Pesquisa de tripanossomatídeos em carrapatos da região do Distrito Federal

Resumo

Tripanossomatídeos são protozoários flagelados pertencentes à família Trypanosomatidae da
qual se destacam os gêneros Leishmania e Trypanosoma por apresentarem exemplares
responsáveis pelo desenvolvimento de doenças tropicais negligenciadas de grande
importância para a saúde pública. No Brasil, a Leishmaniose e a Doença de Chagas são
causadas por protozoários dessa família, Leishmania spp. e Trypanosoma cruzi,
respectivamente, sendo que ambas são transmitidas ao ser humano por insetos
hematófagos. Embora a Leishmania spp. seja transmitida por flebotomíneos e o
Trypanosoma cruzi por triatomíneos, os carrapatos vêm sendo estudados a fim de verificar o
possível envolvimento desses artrópodes no ciclo de transmissão de agentes da família
Trypanosomatidae, uma vez que também realizam repasto sanguíneo. Dessa forma, a
presente pesquisa teve como objetivo geral verificar a ocorrência de protozoários da família
Trypanosomatidae em carrapatos encontrados em capivaras (Hydrochoerus hydrochaeris) de
vida livre do Distrito Federal (DF) e como objetivos específicos identificar as espécies dos
carrapatos coletados e determinar através de métodos moleculares a existência de
tripanossomatídeos nesses artrópodes. As amostras de carrapatos utilizadas no presente
estudo foram coletadas a partir de capivaras de vida livre capturadas em áreas recreativas do
DF em estudo sanitário prévio realizado entre os anos de 2017 e 2019. Os carrapatos foram
removidos diretamente do tecido cutâneo das capivaras e submetidos à extração de DNA
com a utilização de isotiocianato de guanidina e fenol clorofórmio. Para a detecção de
agentes da família Trypanosomatidae, as amostras de DNA foram submetidas à cPCR
utilizando os oligonucleotídeos D75 (5’- GCA GAT CTT GGT TGG CGT AG -3’) e D76 (5’- CGT
TCT CTG TTG CCC CTT TT -3’). Os produtos de amplificação de todas as reações de cPCR
foram separados por eletroforese em gel de agarose 2%, corados em brometo de etídio
(Vetec Sigma-Aldrich®, St Louis, MO) e visualizados sob luz ultravioleta (UV transiluminator®,
UVP LLC, Upland,32 CA). Foram amostrados 558 carrapatos provenientes de 57 capivaras,
sendo que do número total de carrapatos coletados cerca de 69.3% foi identificado como
Amblyomma dubitatum, 29% como Amblyomma sculptum e 1.6% como Amblyomma spp..
Das 229 amostras de DNA testadas para agentes da família Trypanosomatidae, 7 deram
resultado positivo após a cPCR, sendo que 5 eram da espécie A. sculptum (3 fêmeas adultas e
2 machos adultos) e 2 eram da espécie A. dubitatum (1 ninfa e 1 macho adulto). Os
resultados da presente pesquisa evidenciam a presença de agentes da família
Trypanosomatidae em carrapatos das espécies Amblyomma sculptum e Amblyomma
dubitatum provenientes de capivaras de vida livre do DF, todavia o sequenciamento genético
das amostras positivas ainda não foi realizado e não é possível dizer qual é a espécie em
questão. Assim, fazem-se necessários novos estudos para elucidar a relação das espécies A.
dubitatum e A. sculptum no ciclo de transmissão de agentes da família Trypanosomatidae.